如何鉴定空肠弯曲菌
如何鉴定空肠弯曲菌
空肠弯曲菌，你知道多少？
空肠弯曲菌是一种人畜共患病病原菌，可以引起人和动物发生多种疾病，并且是一种食物源性病原菌，被认为是引起全世界人类细菌性腹泻的主要原因。
空肠弯曲菌的鉴定不好做？
怎么办？怎么办？怎么办？
有老师反映空肠弯曲菌的鉴定不好做，小编就此咨询了一些专家老师，得到的信息是，主要由两个方面引起无法鉴定或者鉴定失败：
（1）采样时，由于空肠弯曲菌很娇弱，采样不当容易造成菌体死亡，从而无法进行鉴定。
（2）分离培养时，空肠弯曲菌生长要求比较严格，生长时间长且鉴定实验步骤较多，无法得到较好的鉴定结果。
现场采样：将样品采样样品放入有肉汤的样品袋中，使劲摇晃，使培养液充分洗刷样品，然后将培养液带回实验室进行培养，后续按照国标GB4789.9-2014进行培养及鉴定。
普通采样：按照采样规则采样后按照国标GB4789.9-2014进行培养及鉴定。
取 25 g（mL) 样品（水果、 蔬菜、水产品为 50 g）加入盛有 225 mL Bolton 肉汤的有滤网的均质袋中（若为无滤网均质袋可使用无菌纱布过滤）。
使用重量稀释仪，设置好稀释倍数，仪器自动称量样品重量，根据设置好的稀释倍数，快速准确地加入培养液，无须担心采样时无法精确称量25g，也无需人工换算所需培养液，免除人工加样可能造成的漏液和污染。
用拍击式均质器均质 1 min～2 min，将滤过液进行培养。
在微需氧条件下， 36 ℃±1 ℃培养 4 h，如条件允许配以 100 r/min 的速度进行振荡。必要时测定增菌液的 pH 值并调整至 7.4 ±0.2， 42 ℃±1 ℃继续培养 24 h～48 h。
将 24 h 增菌液、48 h 增菌液及对应的 1:50 稀释液分别划线接种于 Skirrow 血琼脂与 mCCDA 琼脂平板上，微需氧条件下 42 ℃±1 ℃培养 24 h～48 h。另外可选择使用空肠弯曲菌显色平板作为补充。
使用接种仪将稀释好的增菌液接种于Skirrow 血琼脂与 mCCDA 琼脂平板，可以快速均匀地将菌液接种到平板，易于得到单个纯化菌落，提高接种后培养基菌落分辨率。
需进行氧化酶试验、过氧化氢酶试验、马尿酸钠水解试验除、吲哚乙酸酯水解试验等；对于确定为弯曲菌属的菌落，可使用生化鉴定试剂盒或生化鉴定卡代替上述试验进行鉴定。
（1）使用API的CAMPY弯曲杆菌鉴定板条，选取分离得到的可疑菌落配置成0.5MCF菌悬液，按照说明书加入板条中，孵育培养后将数据输入(https://apiweb.biomerieux.com/servlet/Authenticate?action=prepareLogin)得到鉴定结果。
（2）使用VIDAS的CAM试条，选取分离得到的可疑菌落配置成0.5MCF菌悬液，按照说明书的步骤加入板条中，上机进行检测，最终得到鉴定结果。
（3）使用VITEK 2 Compact的NH奈瑟球菌-嗜血杆菌鉴定卡时，选取分离得到的可疑菌落配置成0.5MCF菌悬液，按照说明书的步骤加试管中，上机进行检测，最终得到鉴定结果。
空肠弯曲菌检验程序
